醫療器械的常用滅菌方法及驗證
發布：合翔包(bao)裝 時(shi)間(jian)：2021-10-09醫療器械產(chan)品(pin)(pin)滅(mie)菌的(de)目(mu)的(de)，是(shi)使產(chan)品(pin)(pin)無(wu)(wu)任(ren)何(he)類型(xing)的(de)存(cun)活微生(sheng)(sheng)物(wu)，在滅(mie)菌過程中，微生(sheng)(sheng)物(wu)的(de)死亡規律(lv)是(shi)用指數(shu)(shu)函數(shu)(shu)表(biao)示(shi)的(de)。因此任(ren)何(he)單位產(chan)品(pin)(pin)上微生(sheng)(sheng)物(wu)的(de)存(cun)在可(ke)(ke)用概(gai)率表(biao)示(shi)，概(gai)率可(ke)(ke)以減少到很低，但不可(ke)(ke)能為零。該概(gai)率可(ke)(ke)用無(wu)(wu)菌保(bao)障(zhang)(zhang)水平(ping) (SAL) 表(biao)示(shi)，通(tong)常(chang)無(wu)(wu)菌概(gai)念是(shi)指無(wu)(wu)保(bao)障(zhang)(zhang)水平(ping) (SAL) 達(da)到 10-6。
醫療器械(xie)滅菌驗(yan)證一般分(fen)為安裝確認 (IQ)、操作確認 (OQ) 和(he)性能(neng)確認 (PQ)。
安裝確認(ren)是(shi)指：獲得證據并用文(wen)件證明滅菌設備及其附屬設施，已按照規定的要(yao)求被提供(gong)和安裝。
操作確認是指：當設備(bei)按程(cheng)序運行時，獲得證據并用文(wen)件來(lai)證明已安裝的(de)(de)設備(bei)，有能力在指定(ding)的(de)(de)允差范圍(wei)內提供特(te)定(ding)的(de)(de)過程(cheng)。
性(xing)能(neng)(neng)確認是(shi)指：獲得證(zheng)(zheng)據(ju)并用文(wen)件證(zheng)(zheng)明設備能(neng)(neng)夠(gou)在預先設定的(de)參(can)數(shu)下持續運(yun)行，且(qie)這個(ge)過程加工后的(de)產品是(shi)無菌的(de)。性(xing)能(neng)(neng)確認一(yi)般(ban)包(bao)括物理性(xing)能(neng)(neng)確認和微生物性(xing)能(neng)(neng)確認，器械(xie)所使用的(de)材料對(dui)滅(mie)菌方法的(de)適用性(xing)，也是(shi) 能(neng)(neng)驗(yan)證(zheng)(zheng)中(zhong)的(de)重(zhong)點(dian)。
本文結合國(guo)際上(shang)最新的(de)(de)滅菌(jun)相關(guan)標(biao)準，介紹(shao)了(le)無菌(jun)醫療器械(xie)生產的(de)(de)幾種(zhong)常(chang)用的(de)(de)滅菌(jun)方法及其(qi)驗(yan)證要點，如(ru)環氧乙(yi)烷(wan)滅菌(jun) (EO 滅菌(jun) )、輻(fu)照滅菌(jun)、高壓蒸(zheng)汽滅菌(jun)和(he)甲醛蒸(zheng)汽滅菌(jun)等，以供醫療器械(xie)研究(jiu)和(he)生產單位(wei)參(can)考。
一、環氧乙烷滅菌
20 世紀 50 年(nian)代(dai)起環(huan)(huan)氧乙烷(wan)(ethylene oxide, EO)開始用(yong)于醫(yi)院(yuan)滅菌。經過眾多科(ke)學家的(de)研究證(zheng)明，環(huan)(huan)氧乙烷(wan)被認為是一種滅菌效果較(jiao)好的(de)低溫化學滅菌劑，在常溫下(xia)即有良(liang)好的(de)穿透作用(yong)，對物品無損害(hai)，而被廣泛(fan)用(yong)于畏熱、畏濕的(de)醫(yi)療器械(xie)產品滅菌中。
1.1 滅菌原理
EO 是一種簡單的(de)環氧化(hua)合(he)物(wu)，遇水可形成乙二醇，具有(you)較大的(de)蒸汽壓，對物(wu)品(pin)的(de)穿(chuan)(chuan)透性(xing)較強。據(ju)報道(dao)，EO5min 能穿(chuan)(chuan)透 0.1mm 厚的(de)尼龍(long)薄膜，26min 能穿(chuan)(chuan)透 0.3mm 的(de)氯(lv)丁(ding)膠(jiao)布(bu)，41min 能穿(chuan)(chuan)透 0.39mm 厚的(de)丁(ding)基橡膠(jiao)布(bu)。
如果要達到(dao)(dao)一定的(de)滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)效果，滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)劑必須(xu)充(chong)分接觸物(wu)品的(de)各個表面(mian)，EO 的(de)這種高(gao)(gao)穿(chuan)透(tou)性(xing)大大提(ti)高(gao)(gao)了(le)其(qi)滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)效果。EO 對(dui)細(xi)菌(jun)(jun)(jun)、芽(ya)孢、真菌(jun)(jun)(jun)、立(li)克次體(ti)和病毒(du)等各種微(wei)生物(wu)具有殺(sha)滅(mie)(mie)作用(yong)(yong)，屬于光譜殺(sha)菌(jun)(jun)(jun)劑，其(qi)滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)機理是與細(xi)菌(jun)(jun)(jun)蛋(dan)白質分子、酶(mei)、核酸中的(de)氨基、羥基、羧基相結合，產生烷基化作用(yong)(yong)，對(dui)菌(jun)(jun)(jun)體(ti)細(xi)胞的(de)代謝產生不可逆的(de)破壞，從而達到(dao)(dao)滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)作用(yong)(yong)。
1.2 滅菌驗證
環(huan)氧乙烷滅菌的驗證包括以下(xia) 3 個(ge)步驟：
安(an)(an)(an)裝確認(ren)：一要(yao)(yao)(yao)確認(ren)滅(mie)菌器(qi)隨(sui)機文件(jian)和附件(jian)的(de)完整性，如安(an)(an)(an)裝記錄、圖紙、計算機軟件(jian)、計量裝置的(de)校準等(deng)，二要(yao)(yao)(yao)對滅(mie)菌器(qi)工(gong)作環境的(de)符合(he)性進(jin)行驗(yan)證(zheng)，如水質(zhi)檢測(ce)、安(an)(an)(an)全要(yao)(yao)(yao)求等(deng)，三是(shi)要(yao)(yao)(yao)驗(yan)證(zheng)滅(mie)菌器(qi)安(an)(an)(an)裝是(shi)否符合(he)設(she)備安(an)(an)(an)裝要(yao)(yao)(yao)求，要(yao)(yao)(yao)確認(ren)滅(mie)菌劑的(de)濃(nong)度及質(zhi)量狀況(kuang)。
操(cao)作確認(ren)：驗(yan)證滅菌(jun)設(she)備有能力在指定(ding)的(de)允差范圍內提供特定(ding)的(de)過程，如溫度分(fen)布(bu)試(shi)(shi)驗(yan)、濕(shi)度分(fen)布(bu)試(shi)(shi)驗(yan)、泄(xie)漏試(shi)(shi)驗(yan)、真空速率試(shi)(shi)驗(yan)、空氣(qi)循環試(shi)(shi)驗(yan) ( 如果使(shi)用(yong) ) 等。
性(xing)能確認：包括(kuo)物(wu)理性(xing)能確認和(he)微生物(wu)性(xing)能確認。
物理(li)性(xing)能確認，應(ying)(ying)書(shu)面證明(ming)過程的(de)重現性(xing)，并且符合所有指定的(de)可(ke)接受參(can)數。這些過程包括預(yu)處理(li)、處理(li)、滅菌和(he)通(tong)風(feng)階段(duan)等，操(cao)作重現性(xing)確認一般(ban)至(zhi)少需要3 次(ci)連續運行，適當(dang)時進(jin)行微生物挑戰試驗。環氧(yang)乙(yi)烷(wan)是致癌物，通(tong)風(feng)次(ci)數和(he)解析放置(zhi)的(de)溫度(du)與時長對環氧(yang)乙(yi)烷(wan)的(de)殘留的(de)影響，也(ye)需要作出(chu)相(xiang)應(ying)(ying)的(de)評(ping)價。
微生(sheng)物學性能驗(yan)證，目的(de)是應書面證明在滅菌過程后，產(chan)品的(de)無菌性能已經達到(dao)特定的(de)要求 (SAL=10-6)。
微生物性能驗證的方法(fa)有：生物負載法(fa)和過度(du)滅菌法(fa)。
一般情(qing)況下，EO 滅(mie)菌(jun)微生(sheng)(sheng)物(wu)性能確認(ren)均采用生(sheng)(sheng)物(wu)指(zhi)示劑 (BI，枯草桿菌(jun)芽孢 )。進行微生(sheng)(sheng)物(wu)學性能驗證(zheng)的產(chan)品(pin)，應(ying)采用與其常(chang)規滅(mie)菌(jun)相(xiang)同的包裝，生(sheng)(sheng)物(wu)指(zhi)示物(wu)應(ying)放置(zhi)(zhi)在(zai)被滅(mie)菌(jun)物(wu)品(pin)中最難滅(mie)菌(jun)的部(bu)位(wei)，并在(zai)預處理(li)前就放入選(xuan)定部(bu)位(wei)，且在(zai)整個滅(mie)菌(jun)周期保持該(gai)位(wei)置(zhi)(zhi)。
生物指示物監(jian)測(ce)點(dian)(dian)的數(shu)量應(ying)能驗(yan)證滅(mie)(mie)菌(jun)器內全部被滅(mie)(mie)菌(jun)物品的微生物滅(mie)(mie)活，通常滅(mie)(mie)菌(jun)室(shi)體積≤10m3時，驗(yan)證時至少設置(zhi)體積 V×3 個(ge)(ge)檢測(ce)點(dian)(dian)，但(dan)不少于 5 個(ge)(ge)，日常監(jian)測(ce)至少設置(zhi) V×1.5 個(ge)(ge)檢測(ce)點(dian)(dian)，但(dan)不少于 5 個(ge)(ge)。
滅菌室體(ti)積(ji)在>10m3時(shi)，驗(yan)證(zheng)時(shi)至少(shao)設(she)置體(ti)積(ji) 30＋(V-10)×3 個(ge)檢測點(dian)，日常監測至少(shao)設(she)置 15+(V-10)×1.5 個(ge)檢測點(dian)。這(zhe)里(li)還涉及到溫(wen)濕度探頭的數量等要求，不(bu)(bu)同體(ti)積(ji)的滅菌器有不(bu)(bu)同的要求，可查閱 ISO 11135-1:2007 附錄(lu) C。
由于環(huan)氧乙(yi)烷滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)不存在(zai)通用的經典滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)參數，影(ying)響滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)效果(guo)的因(yin)(yin)素多且相互(hu)關聯，滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)過(guo)程控制復雜，所(suo)以為了保證滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)效果(guo)，對(dui)其滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)過(guo)程進(jin)行嚴格的驗證是必(bi)要的。此外，若滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)設備(bei)、被滅(mie)(mie)(mie)菌(jun)物品和(he)裝載方式任何一個因(yin)(yin)素改變時(shi)，都需要重新進(jin)行驗證。
1.3 產品(pin)放行
日常監測中(zhong)，需要(yao)監測預(yu)處理時的(de)溫度(du)和濕度(du)、處理過(guo)(guo)(guo)程中(zhong)滅菌(jun)(jun)柜內的(de)濕度(du)和時間(jian)、整個滅菌(jun)(jun)過(guo)(guo)(guo)程的(de)溫度(du)和壓力、環氧(yang)乙烷(wan)已注入的(de)證(zheng)據、滅菌(jun)(jun)時間(jian)、解析時的(de)溫度(du)和壓力變化。最終(zhong)只有生(sheng)物指示物 (BI) 培養全部顯陰性且滅菌(jun)(jun)過(guo)(guo)(guo)程參數在性能驗證(zheng)的(de)參數范圍內，產品才可以放(fang)行。
1.4 應用
EO 可(ke)(ke)用(yong)于(yu)不(bu)耐高溫、不(bu)耐濕物(wu)品的滅絕，被認為是一種(zhong)(zhong)滅菌(jun)(jun)效果(guo)最好的化學滅菌(jun)(jun)劑，可(ke)(ke)殺死所(suo)有(you)微生物(wu)包(bao)括細(xi)菌(jun)(jun)以(yi)(yi)及芽孢。EO 具有(you)極強的穿透(tou)性，可(ke)(ke)用(yong)以(yi)(yi)各種(zhong)(zhong)難通透(tou)部(bu)位的滅菌(jun)(jun)，如(ru)有(you)些較(jiao)細(xi)、較(jiao)長的導管用(yong)其他低(di)溫滅菌(jun)(jun)方法很難達到(dao)滅菌(jun)(jun)效果(guo)，而只能選擇 EO或(huo)者輻照。
EO 滅(mie)菌對(dui)物品的損(sun)害也較(jiao)小，滅(mie)菌是(shi)利用(yong)(yong)(yong)烷基化原理而(er)非(fei)氧化過程(cheng)，對(dui)不耐熱的材料(liao)(liao)及(ji)設備(bei)有著非(fei)常廣泛的應(ying)用(yong)(yong)(yong)前景。采用(yong)(yong)(yong) EO 滅(mie)菌時，可以(yi)用(yong)(yong)(yong)各種包裹材料(liao)(liao)包裹，便于(yu)儲存、運輸，打開包裝即可使用(yong)(yong)(yong)避免了交(jiao)叉(cha)污染(ran)的危險，并且(qie)在滅(mie)菌過程(cheng)中，有標準(zhun)的化學、生物監(jian)測手段，從而(er)可以(yi)有效的控制滅(mie)菌質量。
EO 在臨床上有著廣泛的用途，采用 EO 滅菌(jun)的設備及產品包括(kuo)：
硬(ying)式和軟(ruan)式內鏡(jing)，如：關節(jie)鏡(jing)、氣管鏡(jing)、膀(bang)胱鏡(jing)、胃鏡(jing)、腸鏡(jing)、眼底鏡(jing)、耳鏡(jing)、尿道鏡(jing)、胸腔鏡(jing)等等；
醫療設備，如：麻醉(zui)設備、人工腎、透熱設備、電線、表頭(tou)、心肺機(ji)、血(xue)透等；
儀器：電鉆、電燒器、牙鉆、顯微手術器、神經刺激器、壓力計、外殼手術起、骨鉆、針頭、人工關節等；
橡膠制品：導管、擴張器、引流管、氣(qi)管內插管、手套(tao)、起搏器、心瓣膜、噴霧器等等。
2、60Co-γ輻照滅菌(jun)法(fa)
上(shang)世紀 50 年代(dai)末，各國紛紛建造大型的(de) 60Co-γ射線輻照源，用(yong)于商業化的(de)輻照加工(gong)。從此 60Co-γ射線滅(mie)菌(jun)(jun)技術(shu)的(de)應用(yong)領域(yu)迅速擴展(zhan)，從最初對一(yi)次(ci)性(xing)使用(yong)的(de)醫(yi)(yi)療(liao)用(yong)品滅(mie)菌(jun)(jun)拓(tuo)展(zhan)到醫(yi)(yi)療(liao)器(qi)械材料滅(mie)菌(jun)(jun)、醫(yi)(yi)療(liao)藥品滅(mie)菌(jun)(jun)、食品滅(mie)菌(jun)(jun)保鮮、一(yi)次(ci)性(xing)生(sheng)活用(yong)品滅(mie)菌(jun)(jun)、環境(jing)微(wei)生(sheng)物(wu)污(wu)染治理等(deng)多(duo)個方(fang)面。
60Co-γ射線(xian)滅(mie)菌(jun)有很多的(de)優點，如不用做生物指示物(BI) 或產(chan)(chan)品(pin)的(de)無菌(jun)實驗、在滅(mie)菌(jun)過程(cheng)中溫度變(bian)化很小、射線(xian)可以到(dao)達器械管(guan)腔內部、滅(mie)菌(jun)后的(de)產(chan)(chan)品(pin)不需要再處理，可以直接(jie)使用。但 60Co-γ射線(xian)對(dui)高分子(zi)材料和包裝材料破壞(huai)(huai)性有一定的(de)破壞(huai)(huai)作用，滅(mie)菌(jun)站對(dui)人和環境也存(cun)在污染的(de)風險，因此60Co-γ射線(xian)的(de)應(ying)用也受到(dao)了(le)很大(da)的(de)限制。
2.1 滅菌原理
輻(fu)照技術是(shi) 20 世紀發展起來的(de)(de)一(yi)種滅(mie)菌保(bao)鮮技術，是(shi)以輻(fu)射(she)(she)加工技術為基礎(chu)，運(yun)用 X 射(she)(she)線、γ射(she)(she)線或高速(su)電子束等電力輻(fu)射(she)(she)產生的(de)(de)高能(neng)射(she)(she)線，在能(neng)量的(de)(de)傳遞和轉移過程中，產生強大的(de)(de)物理效應和生物效應，達到(dao)殺蟲、殺菌、一(yi)直生理過程的(de)(de)目的(de)(de)。
其原理主要(yao)是破壞細(xi)(xi)菌(jun)細(xi)(xi)胞中的 DNA 和(he) RNA，受損的 DNA 和(he) RNA 分子發生降解，失去合成蛋白(bai)質和(he)遺傳功能，使細(xi)(xi)胞死亡。 60Co-γ頻率高到 3×1018~3×1021Hz，其能量(liang)大于分子鍵能，故(gu)可使分子電離和(he)斷鍵而殺菌(jun)。
其殺菌機理為 60Co-γ射線直接破壞(huai)微生物的(de) DNA、蛋白質和酶而(er)致死(si)，或(huo)者被微生物中的(de)水(shui)吸收(shou)而(er)激(ji)(ji)發或(huo)電力，產(chan)生激(ji)(ji)發的(de)水(shui)分子(zi)、電子(zi)、水(shui)離子(zi)，或(huo)裂解為氫自由基、羥自由基，由此產(chan)生一系(xi)列的(de)與 DNA、蛋白質、酶的(de)氧化還(huan)原反應，致微生物死(si)亡。
2.2 滅菌驗證
輻照滅菌(jun)的驗證包(bao)括以下主要內容：
安(an)(an)裝確認(ren)：確認(ren)輻射源 ( 源的(de)(de)活性或加速器(qi)的(de)(de)參數(shu) )、傳送系統、附屬設施 ( 包括相關的(de)(de)軟件 )、計量裝置的(de)(de)計量狀態、工作環境的(de)(de)符(fu)合性進行(xing)驗(yan)證(zheng)，如(ru)安(an)(an)全(quan)要求等。
操作確認：針對每個傳送(song)系統，通(tong)過測量(liang)不(bu)(bu)同(tong)(tong)位置的(de)(de)(de)吸收(shou)劑(ji)量(liang)驗證(zheng)不(bu)(bu)同(tong)(tong)的(de)(de)(de)輻(fu)(fu)照(zhao)容(rong)器(qi)的(de)(de)(de)計量(liang)分布，不(bu)(bu)同(tong)(tong)輻(fu)(fu)照(zhao)容(rong)器(qi)以及容(rong)器(qi)內的(de)(de)(de)不(bu)(bu)同(tong)(tong)位置的(de)(de)(de)吸收(shou)劑(ji)量(liang)都在(zai)(zai)規定(ding)的(de)(de)(de)范圍內。一般在(zai)(zai)加源后、源的(de)(de)(de)位置及形態改變、傳送(song)系統變化、輻(fu)(fu)照(zhao)容(rong)器(qi)改變時(shi)都需(xu)要進行操作確認。
性能確認(ren)：包括物理性能確認(ren)和微生物性能確認(ren)。
物理性能確認(ren)包括(kuo)(kuo)確認(ren)產(chan)(chan)品(pin)放裝載(zai)模式(shi)(shi)、包括(kuo)(kuo)日(ri)常(chang)產(chan)(chan)品(pin)的包裝方式(shi)(shi) ( 尺寸，密度等 )，劑量(liang)分(fen)布、包括(kuo)(kuo)最大(da)和最小吸收劑量(liang)及位置，產(chan)(chan)品(pin)的最大(da)可吸收劑量(liang) ( 評價滅菌劑量(liang)對產(chan)(chan)品(pin)的影響 )。
微生物學(xue)性(xing)能(neng)(neng)驗證，目的是應書(shu)面證明(ming)在滅(mie)菌過程(cheng)后(hou)，產品的無菌性(xing)能(neng)(neng)已經達到特定(ding)的要求 (SAL=10-6)。
2.3 產品放行
輻照(zhao)滅(mie)菌(jun)(jun)的產品批次(ci)(ci)放(fang)行采用參數放(fang)行，不需要(yao)進行無菌(jun)(jun)實驗(yan)。通過放(fang)置在最(zui)大可(ke)吸(xi)收劑(ji)量(liang)(liang)點和最(zui)小(xiao)可(ke)吸(xi)收劑(ji)量(liang)(liang)點的劑(ji)量(liang)(liang)計(ji)，檢測每批次(ci)(ci)滅(mie)菌(jun)(jun)的最(zui)大和最(zui)小(xiao)劑(ji)量(liang)(liang)，最(zui)大和最(zui)小(xiao)滅(mie)菌(jun)(jun)劑(ji)量(liang)(liang)在驗(yan)證劑(ji)量(liang)(liang)的范圍內(nei)，產品即可(ke)放(fang)行。
這(zhe)一(yi)放行(xing)準(zhun)則是(shi)基(ji)于定(ding)期的輻照滅菌劑量審核，審核內(nei)容一(yi)般涉及到(dao)生(sheng)物(wu)負載限度(du)、微(wei)生(sheng)物(wu)特性分析(xi)、建立滅菌劑量的方(fang)法等。
2.4 應用
在(zai)使用 60Co-γ射(she)(she)(she)線滅(mie)菌(jun)時，不同(tong)(tong)(tong)菌(jun)種，甚至同(tong)(tong)(tong)一(yi)(yi)菌(jun)株的(de)(de)不同(tong)(tong)(tong)發育(yu)階段的(de)(de)抗(kang)(kang)輻(fu)(fu)(fu)射(she)(she)(she)性(xing)均(jun)不同(tong)(tong)(tong)。一(yi)(yi)般來(lai)講，細菌(jun)的(de)(de)營(ying)養細胞抗(kang)(kang)輻(fu)(fu)(fu)射(she)(she)(she)性(xing)弱(ruo)，芽孢的(de)(de)抗(kang)(kang)輻(fu)(fu)(fu)射(she)(she)(she)性(xing)強(qiang)(qiang)。同(tong)(tong)(tong)一(yi)(yi)種菌(jun)株在(zai)不同(tong)(tong)(tong)介質中(zhong)的(de)(de)抗(kang)(kang)輻(fu)(fu)(fu)射(she)(she)(she)性(xing)也是不同(tong)(tong)(tong)的(de)(de)。在(zai)有(you)抗(kang)(kang)菌(jun)劑(ji)(ji)存在(zai)的(de)(de)條件下，大(da)多數菌(jun)的(de)(de)抗(kang)(kang)輻(fu)(fu)(fu)射(she)(she)(she)性(xing)增強(qiang)(qiang)，在(zai)缺氧條件下，菌(jun)種的(de)(de)抗(kang)(kang)輻(fu)(fu)(fu)射(she)(she)(she)性(xing)也有(you)所增強(qiang)(qiang)。一(yi)(yi)般來(lai)說輻(fu)(fu)(fu)照劑(ji)(ji)量(liang)(liang)大(da)，滅(mie)菌(jun)效(xiao)果好。但是輻(fu)(fu)(fu)照劑(ji)(ji)量(liang)(liang)過(guo)大(da)，對樣品中(zhong)的(de)(de)某些成分可能會有(you)一(yi)(yi)定得影響，因此(ci)在(zai)具體(ti)的(de)(de)輻(fu)(fu)(fu)照實踐中(zhong)需要確定輻(fu)(fu)(fu)照劑(ji)(ji)量(liang)(liang)。
由于γ射線本(ben)身的能(neng)量大(da)、輻(fu)(fu)射強(qiang)，對物質損(sun)害(hai)大(da)，對輻(fu)(fu)射滅菌產(chan)品(pin)的材(cai)質有一定的要求。有些產(chan)品(pin)在滅菌后(hou)出(chu)現了材(cai)質的強(qiang)度、清晰度、顏(yan)色、生(sheng)物相(xiang)容(rong)性以及包裝的完整性等方面的問題，有的是(shi)在輻(fu)(fu)射滅菌完成后(hou)不久便顯現出(chu)來(lai)，這(zhe)主要是(shi)因為(wei)部分企業的產(chan)品(pin)特別是(shi)所用的包裝材(cai)料不適(shi)合輻(fu)(fu)射滅菌方式。
對于適合輻射滅(mie)菌的(de)(de)產(chan)品和材(cai)質的(de)(de)選(xuan)擇(ze)，在(zai)(zai) GB18280-2000《醫(yi)療保健(jian)產(chan)品滅(mie)菌確認和常規控制(zhi)要求輻射滅(mie)菌》的(de)(de)附錄(lu) A 中給出了器材(cai)材(cai)料(liao)和包(bao)裝材(cai)料(liao)的(de)(de)確認方法(fa)；在(zai)(zai)GB16352《一次性醫(yi)療用品γ射線輻射滅(mie)菌標(biao)準》的(de)(de)附錄(lu) C 中則(ze)較為詳細的(de)(de)列舉(ju)了適合輻射滅(mie)菌的(de)(de)醫(yi)療用品。
3、高壓蒸汽滅菌
高壓蒸汽滅菌是熱力消毒方(fang)法中最(zui)(zui)普遍、效果最(zui)(zui)可靠的一種滅菌方(fang)法，其優點是蒸汽穿透(tou)力強，能殺滅所有(you)微(wei)生(sheng)物(wu)。
3.1 滅菌原理
高壓(ya)滅菌是濕熱消毒法的(de)(de)一種(zhong)，其(qi)原理是：在密閉的(de)(de)蒸鍋(guo)(guo)內，其(qi)中的(de)(de)蒸汽不(bu)(bu)能(neng)外溢，壓(ya)力不(bu)(bu)斷上升，使水(shui)的(de)(de)沸點不(bu)(bu)斷提高，從而(er)鍋(guo)(guo)內溫度(du)也隨之增加。
在 0.1MPa 的(de)壓力即 103.4kPa(1.05kg/cm2) 蒸汽壓下，鍋內(nei)溫度(du)達 121℃，維持15~30min。當(dang)溫度(du)超過細(xi)胞最(zui)佳生理活(huo)動的(de)溫度(du)范圍時(shi)，細(xi)胞代謝減緩，細(xi)胞的(de)蛋(dan)白質、酶及核酸會被永久(jiu)性破壞，從而導(dao)致細(xi)胞發(fa)生不可逆轉的(de)死(si)亡。在此蒸汽溫度(du)下，可以很快殺死(si)各種細(xi)菌及其高度(du)耐熱(re)的(de)芽孢，是最(zui)可靠、應用最(zui)普遍的(de)物理滅菌法。
3.2 滅菌驗證
滅菌驗(yan)證一般分為以(yi)下幾(ji)部分內容(rong)。
安(an)(an)(an)裝確(que)(que)認：一(yi)要(yao)(yao)確(que)(que)認滅(mie)菌(jun)器(qi)(qi)隨機文件和附件的(de)完整(zheng)性(xing)，如安(an)(an)(an)裝記(ji)錄、圖紙、計算機軟件、計量(liang)裝置的(de)校準 ( 溫度表(biao)、壓力表(biao)、時(shi)間計量(liang)表(biao) ) 等；二(er)要(yao)(yao)對滅(mie)菌(jun)器(qi)(qi)工作環境的(de)符合性(xing)進行驗證，如水質檢(jian)測、安(an)(an)(an)全要(yao)(yao)求等；三是要(yao)(yao)驗證滅(mie)菌(jun)器(qi)(qi)安(an)(an)(an)裝是否(fou)符合設備安(an)(an)(an)裝要(yao)(yao)求，確(que)(que)認滅(mie)菌(jun)劑(ji)的(de)濃度及質量(liang)狀況(kuang)。
操作確認(ren)：驗證滅(mie)菌設備有能力在指(zhi)定(ding)的(de)允差范圍(wei)內提供特(te)定(ding)的(de)過程，如熱分(fen)布(bu)試(shi)驗、包括空(kong)載熱分(fen)布(bu)試(shi)驗等。
性能(neng)確認(ren)(ren)：物(wu)理性能(neng)確認(ren)(ren)和微生(sheng)物(wu)性能(neng)確認(ren)(ren)，包括滿載(zai)熱分布試(shi)驗 ( 最高(gao)最低(di)溫度點 )熱穿(chuan)透試(shi)驗等，生(sheng)物(wu)指示物(wu)的使用等。
3.3 產品放行
日常(chang)監(jian)測中，需(xu)要(yao)監(jian)測預處理時(shi)的溫(wen)度、整個滅(mie)菌(jun)過程的溫(wen)度和壓力(li)等(deng)。最終只有生物指示物 (BI) 培養(yang)全部顯陰性且(qie)滅(mie)菌(jun)過程參數(shu)在性能驗證的參數(shu)范圍內，產品才可(ke)以放行(xing)。
3.4 應用
由于高(gao)(gao)壓(ya)蒸汽滅(mie)菌(jun)本身具備(bei)不破壞(huai)產品表面并藥(yao)品、藥(yao)品溶液、玻(bo)璃器械、培(pei)養基等在高(gao)(gao)溫高(gao)(gao)濕(shi)條件(jian)下不發生變化(hua)或損壞(huai)的物(wu)質(zhi)，均(jun)可(ke)以采(cai)用(yong)高(gao)(gao)壓(ya)滅(mie)菌(jun)法。
高壓(ya)蒸汽滅菌(jun)已經被廣泛地應用(yong)到(dao)各(ge)種(zhong)生化實(shi)驗(yan)室(shi)和醫院(yuan)，用(yong)于一些培養基、玻璃制(zhi)品、生理(li)鹽水等的(de)滅絕。
目(mu)前的(de)高壓(ya)蒸汽滅菌器(qi)的(de)類型和樣式較多，如：
①下排(pai)氣式壓力(li)蒸汽滅菌器是(shi)普遍應用的(de)滅菌設備，壓力(li)升至 102.9kPa(1.05kg/cm2)，溫度達121~126℃，維持 20~30min，可達到(dao)滅菌目的(de)。
②脈(mo)動真(zhen)空壓力(li)蒸汽(qi)滅菌(jun)(jun)器已成為目前最先進的(de)(de)滅菌(jun)(jun)設備。滅菌(jun)(jun)條件要(yao)求：蒸汽(qi)壓力(li)205.8kPa(2.1kg/cm2)，溫(wen)度達(da)132℃以上并維持 l0min，即可殺死包(bao)括(kuo)具有(you)頑強抵抗力(li)的(de)(de)細菌(jun)(jun)芽胞在內的(de)(de)一切微(wei)生物(wu)。
高壓蒸(zheng)汽滅菌的注意事項：
(1) 必須先用流通蒸汽或真空排除滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)器(qi)(qi)腔內空氣。若滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)器(qi)(qi)內有空氣存在，則(ze)壓(ya)力表上所指示(shi)的壓(ya)力是滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)器(qi)(qi)內蒸汽和空氣二者的總壓(ya)，結果(guo)壓(ya)力雖達到(dao)要求，但(dan)滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)溫度卻達不(bu)到(dao)，達不(bu)到(dao)滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)(jun)效果(guo)。
(2) 滅菌(jun)(jun)時間必(bi)須是從(cong)全部裝載的滅菌(jun)(jun)物(wu)均已達(da)到(dao)滅菌(jun)(jun)溫(wen)度時開始計(ji)算(suan)。
(3) 裝(zhuang)載方式的確定(ding)，不同(tong)的裝(zhuang)載類型須驗證確認(ren)，避免隨意性。
(4) 高(gao)壓蒸汽(qi)滅菌器必須進行(xing)周期性驗(yan)證。
4、甲醛蒸汽滅菌
現代的低(di)溫蒸汽甲醛滅(mie)菌(jun) (Sterilization by Low Temperature Steam Formaldehyde, LTSF) 方(fang)法，是上世紀 60 年代發明的一(yi)(yi)種低(di)溫滅(mie)菌(jun)技術，使用(yong)負壓低(di)溫蒸汽甲醛法對一(yi)(yi)些怕(pa)熱怕(pa)濕的醫療(liao)器械進行滅(mie)菌(jun)。
4.1 滅菌原理
甲(jia)(jia)醛(quan)殺菌(jun)(jun)作(zuo)用是阻止(zhi)細(xi)菌(jun)(jun)核蛋白的(de)(de)(de)合成，影(ying)響生物(wu)細(xi)胞漿(jiang)基(ji)(ji)(ji)本代謝(xie)。一些研究(jiu)指出，甲(jia)(jia)醛(quan)為強(qiang)烷(wan)化(hua)劑，其殺菌(jun)(jun)原理是一種非特殊性的(de)(de)(de)烷(wan)基(ji)(ji)(ji)化(hua)作(zuo)用，甲(jia)(jia)醛(quan)分子直接作(zuo)用于細(xi)菌(jun)(jun)的(de)(de)(de)菌(jun)(jun)體(ti)蛋白質、酶以及核酸的(de)(de)(de)活性基(ji)(ji)(ji)團，使蛋白質鏈上(shang)的(de)(de)(de)氨基(ji)(ji)(ji)、壓氨基(ji)(ji)(ji)、羥基(ji)(ji)(ji)、羧基(ji)(ji)(ji)等烷(wan)基(ji)(ji)(ji)化(hua)，從而破壞細(xi)菌(jun)(jun)的(de)(de)(de)蛋白質，導致微生物(wu)的(de)(de)(de)死(si)亡。
其中(zhong)烷基化(hua)效(xiao)應包括兩種作(zuo)(zuo)用：一是可降低水對蛋白質的(de)穿透、彭潤(run)作(zuo)(zuo)用，使其硬化(hua)；二是對核酸的(de)烷基化(hua)反應，可導致病毒的(de)滅活。
甲(jia)醛(quan)對細菌(jun)繁殖、芽(ya)孢、分枝桿(gan)菌(jun)、真菌(jun)和(he)(he)病(bing)毒等(deng)各種微生物(wu)都有高效(xiao)的殺滅作(zuo)用(yong)。甲(jia)醛(quan)對細菌(jun)病(bing)毒素(su)亦有破壞作(zuo)用(yong)，對肉(rou)毒桿(gan)菌(jun)素(su)和(he)(he)葡萄球菌(jun)腸毒素(su)，用(yong) 50g/L 甲(jia)醛(quan)水溶液作(zuo)用(yong) 30min 可將其完全破壞。
4.2 滅菌驗證
無(wu)(wu)菌生(sheng)產環(huan)境(jing)甲醛蒸(zheng)汽滅菌驗證(zheng)(zheng)，驗證(zheng)(zheng)的(de)目(mu)的(de)為(wei)甲醛滅菌的(de)時間(jian)、排風(feng)時間(jian)及效果驗證(zheng)(zheng)。確保無(wu)(wu)菌環(huan)境(jing)中用甲醛滅菌提供的(de)空氣環(huan)境(jing)始終(zhong)復合國家《藥品生(sheng)產質量管(guan)理(li)規范(fan)》對潔凈室中空氣浮游菌及表面細(xi)菌的(de)規定。
在(zai)準備甲醛蒸汽滅(mie)菌(jun)的房間(jian)(jian)取(qu)樣(yang)點(dian)(dian)(dian)位置(zhi)放入驗證裝置(zhi)，指示(shi)物采用(yong)枯草桿菌(jun)芽(ya)孢。取(qu)樣(yang)點(dian)(dian)(dian)數量根據滅(mie)菌(jun)區域面積確定(ding)。在(zai)≤ 9m3的空間(jian)(jian)放置(zhi) 2 個取(qu)樣(yang)點(dian)(dian)(dian)，在(zai)小于(yu) 14m3大(da)于(yu) 9m3的房間(jian)(jian)放置(zhi) 3 個取(qu)樣(yang)點(dian)(dian)(dian)，大(da)于(yu) 14m3的空間(jian)(jian)放置(zhi) 4 個取(qu)樣(yang)點(dian)(dian)(dian)。
在無菌(jun)生產(chan)環境(jing)中取(qu)樣(yang)點設置在分裝(zhuang)(zhuang)機罩(zhao)內(nei)、出瓶轉(zhuan)盤、分裝(zhuang)(zhuang)間(jian)回風口、分裝(zhuang)(zhuang)間(jian)回風管、分裝(zhuang)(zhuang)機底部。在滅菌(jun)后進(jin)行取(qu)樣(yang)點菌(jun)片(pian)培(pei)養，將菌(jun)片(pian)接種于(yu)培(pei)養液中 37℃培(pei)養至7d，若無菌(jun)生長(chang)則判斷滅菌(jun)合格。
目前(qian)國(guo)內對低溫(wen)甲醛蒸汽(qi)滅(mie)菌(jun)器(qi)功效檢驗尚沒有標(biao)準，對低溫(wen)甲醛蒸汽(qi)滅(mie)菌(jun)器(qi)的滅(mie)菌(jun)效果生物指示劑也沒有專(zhuan)門研(yan)究(jiu)定(ding)標(biao)，因此這將影響(xiang)低溫(wen)蒸汽(qi)甲醛滅(mie)菌(jun)技術的研(yan)究(jiu)和推(tui)廣應用(yong)。
甲醛熏蒸法滅菌目前(qian)使用較少，驗(yan)證及產品放行準則可參照國際標(biao)準 ISO 25424:2009。
4.3 應用
常溫常壓下使(shi)(shi)用(yong)甲醛(quan)熏(xun)蒸消(xiao)毒主要利用(yong)化(hua)學(xue)法(fa)和加熱(re)法(fa)產生甲醛(quan)氣體。將(jiang)福(fu)(fu)爾(er)馬林或(huo)多(duo)聚甲醛(quan)與某些強(qiang)氧化(hua)劑(ji)如高錳酸鉀、氯制劑(ji)等發生化(hua)學(xue)反(fan)應，通過化(hua)學(xue)產熱(re)促使(shi)(shi)甲醛(quan)氣化(hua)。加熱(re)法(fa)是將(jiang)福(fu)(fu)爾(er)馬林或(huo)多(duo)聚甲醛(quan)直接(jie)用(yong)電加熱(re)，使(shi)(shi)甲醛(quan)氣化(hua)進行熏(xun)蒸消(xiao)毒。
有(you)研(yan)究用每(mei)立方米 120ml 福爾(er)馬(ma)林與 60g 高錳酸鉀混合反應產生甲醛(quan)氣(qi)體熏(xun)(xun)蒸(zheng)(zheng) 1h，可(ke)使(shi)物體表面達(da)到消毒，熏(xun)(xun)蒸(zheng)(zheng) 75min 可(ke)使(shi)尿管(guan)達(da)到有(you)效消毒。甲醛(quan)熏(xun)(xun)蒸(zheng)(zheng)消毒后(hou)會(hui)殘留濃烈的(de)甲醛(quan)刺激性氣(qi)味(wei)，可(ke)以(yi)采(cai)用化學中和(he)法進行消除。在(zai)熏(xun)(xun)蒸(zheng)(zheng)消毒結束后(hou)，在(zai)熏(xun)(xun)箱底層放入一定量的(de)濃氨水繼續熏(xun)(xun)蒸(zheng)(zheng) 30min 可(ke)以(yi)降低刺激性氣(qi)味(wei)。
甲醛(quan)可用于對怕熱怕濕怕腐蝕的(de)(de)醫療用品(pin)的(de)(de)消毒與滅(mie)菌，可采用低溫(wen)蒸汽甲醛(quan)滅(mie)菌的(de)(de)器材主(zhu)要有：
外科器械、包括(kuo)導(dao)氣管(guan)、麻(ma)醉用具、關節鏡(jing)、心導(dao)管(guan)、腹腔鏡(jing)、膀胱鏡(jing)等；
診療器(qi)械有(you)血氧合器(qi)、濕(shi)化(hua)器(qi)、注射器(qi)、呼吸機、乳膠導管、乳膠手(shou)套(tao)等；
電(dian)(dian)(dian)子器材有植入電(dian)(dian)(dian)極、變壓器、電(dian)(dian)(dian)位器、電(dian)(dian)(dian)容器、導(dao)線以及眼(yan)科手術使用的熱(re)敏器材等。
